Durante meu doutorado na Universidade de Bari (Itália), desenvolvi inicialmente um método para analisar modificações pós‑traducionais (PTMs), particularmente fosforilação de proteínas, em complexos proteicos como o complexo I da cadeia respiratória mitocondrial. A combinação de BN‑PAGE com enriquecimento por dióxido de titânio permitiu o estudo da modulação dependente de fosforilação na atividade de complexos proteicos.
Realizei um estágio de pós‑doutorado no Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular da Universidade do Sul da Dinamarca, onde minha pesquisa concentrou‑se no desenvolvimento de métodos baseados em espectrometria de massas para analisar PTMs em proteínas, incluindo glicosilação, fosforilação e oxidação, como ferramentas para investigar suas alterações dinâmicas em diferentes sistemas fisiopatológicos. Em particular, desenvolvi um método inovador que combina enriquecimento por dióxido de titânio com cromatografia de interação hidrofílica (HILIC) para a análise seletiva de glicopeptídeos sialilados, permitindo a caracterização da N‑glicosilação sítio‑específica com ênfase em glicanas contendo ácido siálico. Além disso, expandi meu trabalho para outros tipos de glicosilação, incluindo a análise de N‑glicanas do tipo high‑mannose e complexas, bem como O‑glicosilação do tipo mucina, por meio da integração de estratégias de digestão enzimática com espectrometria de massas.
Ao longo de minha carreira, estive envolvido no desenvolvimento de novas sondas químicas e na sua aplicação para o enriquecimento de PTMs específicas, incluindo peptídeos O‑GlicNAcilados, heptosilados e peptídeos contendo cisteína modificada. No que se refere à glicosilação de proteínas, contribuí para o desenvolvimento de estratégias de marcação quimioenzimática para O‑GlcNAc, uma glicosilação dinâmica e regulatória, utilizando galactosiltransferases mutantes e química de clique (“click chemistry”) para o enriquecimento seletivo e identificação de proteínas O‑GlicNAciladas. Essas abordagens combinaram derivatização química com modificação enzimática para viabilizar o estudo de PTMs de baixa abundância em amostras biológicas complexas. Esses métodos foram aplicados a diversas matrizes biológicas, incluindo plasma, micropartículas, exossomos e células primárias, e em vários modelos de doenças, particularmente doenças infecciosas. Atualmente, são utilizados mundialmente para o estudo de PTMs. Além das descobertas científicas, alguns desses métodos foram fundamentais para a criação de empresas spin‑off (GlyProVac) e para a comercialização de kits (CysPAT).
Atualmente, sou Professor Titular no Departamento de Parasitologia do Instituto de Ciências Biomédicas da Universidade de São Paulo (Brasil) e Professor Associado Honorário na School of Natural Sciences da Macquarie University, em Sydney, Austrália. Minha atividade de pesquisa concentra‑se em: 1) desenvolvimento de estratégias analíticas e computacionais para analisar PTMs, incluindo glicosilação de proteínas (N‑ligada, O‑ligada e O‑GlcNAc), em contextos fisiopatológicos; 2) aplicação de abordagens de biologia de sistemas para compreender as redes biológicas reguladas por essas modificações; e 3) descoberta de biomarcadores. No campo da glicosilação, meu grupo investiga os papéis funcionais da glicosilação de proteínas nas interações hospedeiro‑patógeno, com ênfase na maquinaria de glicosilação de parasitos e na caracterização glicoproteômica de vesículas extracelulares. Essas atividades são aplicadas a diversos sistemas biológicos, desde células de Trypanosoma cruzi até biofluidos humanos.
Ao longo da minha carreira, atuei em comitês executivos de sociedades nacionais e internacionais de proteômica e espectrometria de massas, incluindo BrMASS, BrProt e HUPO, tendo sido presidente da BrProt por dois mandatos. Tive o privilégio de ministrar cursos de proteômica em universidades na Europa, América do Sul e Oceania. Ao longo desses anos, participei da criação e distribuição de recursos educacionais, como cursos online, webinars e materiais instrucionais, para disseminar abordagens teóricas e metodológicas em química analítica, proteômica e biologia de doenças infecciosas.
Instituição/ Departamento: Departamento de Parasitologia, Instituto de Ciências Biomédicas, Universidade de São Paulo
Áreas de Atuação: Proteínas, Glicídeos, Parasitologia, Protozoologia Parasitária Humana, Oncologia
Responsabilidade no Projeto: O Prof. Giuseppe Palmisano, especialista em proteômica e modificações pós-traducionais, contribuirá significativamente para o INCT Glicosaúde com três principais frentes de pesquisa: Caracterização de Modificações Pós-Traducionais: Ele otimizará estratégias de enriquecimento para glicosilações O-ligadas e arginilação, além de desenvolver novos marcadores químicos, aplicando-os a amostras biológicas como T. cruzi e células hospedeiras. Descoberta de Biomarcadores: Liderará uma plataforma baseada em espectrometria de massas para identificar proteínas em amostras de urina e soro de modelos experimentais e pacientes com doença de Chagas, buscando assinaturas moleculares específicas. Análise de Glicosilação em T. cruzi: Investigará o glicosiloma de cepas de T. cruzi, correlacionando perfis de glicosilação com virulência e resistência, além de testar inibidores de vias de glicosilação. Sua expertise será crucial para a identificação de biomarcadores e o desenvolvimento de terapias inovad.